Nobimpex 無(wú)血清T細胞培養基 003  004套裝適用于促進(jìn)和優(yōu)化人來(lái)源 T 細胞的擴增。此培養基可支持高密度細胞的培養。無(wú)血清培養相比含血清培養可以減少批次差異，并且可以消除血清帶來(lái)的安全隱患。該培養基套裝包含“無(wú)血清T細胞促生長(cháng)添加劑Nobimpex 004（貨號N104-0050，50ml）"和“無(wú)血清T細胞擴增培養基Nobimpex003（貨號N103-1000，1000ml）"。其中 “Nobimpex 004"獨立使用于免疫細胞治療中T細胞前5天的擴增培養，而“Nobimpex 003"則完成T細胞擴增培養的后續幾天的工作。

無(wú)動(dòng)物來(lái)源成分：

Nobimpex T細胞培養基套裝均為無(wú)血清培養基，不含血清及其他動(dòng)物來(lái)源成分，不含抗生素和細胞因子，人血清白蛋白和人轉鐵蛋白是僅有的人來(lái)源成分（供體的HIV1&2、HBV和HCV檢測為陰性）。

高質(zhì)量控制：

培養基的配制：

Nobimpex 003需要添加，加入 20ml200mM 的L-溶液或者0.584 g  L-谷粉末（輻射滅菌）每升。建議“Nobimpex 004"按照細胞培養前5天、分2次進(jìn)行添加（每次25ml）；5天后使用適量的“Nobimpex 003"進(jìn)行培養擴增。所有培養基在使用前請按照確定的配方分別添加必須的刺激用抗體和細胞因子。該培養基是無(wú)菌液體（1X），可按需選擇添加抗生素。

使用說(shuō)明：

1.   取25ml“Nobimpex 004培養基"添加確定量的刺激用抗體和細胞因子；

2.   按照已確定的方法來(lái)準備新鮮或者凍存的 PBMNCs (外周血單個(gè)核細胞)；

3.   用計數器計數細胞數量；

4.   轉移適當數量的細胞到含有上述培養基（已加入細胞因子和刺激抗體）的培養瓶中；

5.   把培養瓶放入培養箱中，37 ℃，5% CO2培養；

6.   第3天，添加另外25ml已配制好的“Nobimpex 004培養基" （已加入細胞因子和刺激抗體）；

7.   第5天及其余時(shí)間，添加適量的已配制好的 “Nobimpex 003培養基" （已加入細胞因子和刺激抗體）。

產(chǎn)品特性:

Nobimpex 無(wú)血清T細胞培養基套裝(Nobimpex003&004)已經(jīng)經(jīng)過(guò)嚴格的測試，可用于PBMNC中的T細胞擴增。本產(chǎn)品已與其他幾種商業(yè)化可用的無(wú)血清培養基做了T細胞擴增比較。實(shí)驗中，200，000 PBMNCs/ml 在本產(chǎn)品和另一商業(yè)化培養基中培養7天，培養基含有100 IU/ml IL-2和anti-CD3 (OKT3， 20ng/ml)抗體。

實(shí)驗中擴增的T細胞使用51鉻釋放分析來(lái)測試細胞溶解能力。靶細胞(K562，人慢性白血病細胞)，使用51鉻標記并連接到anti-CD3 (OKT3) Fc受體。當與效應或者細胞毒T細胞混合時(shí)，靶細胞就會(huì )凋亡或者溶解，并釋放51鉻。上清中51鉻的釋放量與靶細胞的死亡及功能T細胞的數量成正比。