淋巴細胞分離液是一種根據細胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度，進(jìn)行細胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細胞分離液有Ficoll淋巴細胞分離液、Percoll淋巴細胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細胞的方法均為密度梯度離心法。

 

分離原理：外周血中單個(gè)核細胞和單核細胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細胞不同，淋巴細胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布，從而將各種血細胞加以分離。

 

淋巴細胞分離液的使用方法：

 

1、準備無(wú)菌的15ml離心管或錐形管； 

2、加入淋巴細胞分離液3ml；（注意：淋巴細胞分離液使用前需恢復室溫，18-25℃）

3、Hank~s液或PBS緩沖液1:1比列（如果全血樣本粘稠，可適當增大比例）稀釋抗凝過(guò)的全血樣品。

4、小心沿著(zhù)壁管，接近分離液層面，非常緩慢地加入新鮮的稀釋過(guò)的全血樣品在淋巴細胞分離液上面；（切記不要攪渾淋巴細胞分離液）

5、小心放進(jìn)離心機（水平轉子），4℃離心20-30分鐘，速度為400g-1000g；（注意：離心機剎車(chē)應取消，需等待自然停止）

6、小心取出離管，切記不要震動(dòng)；

7、可見(jiàn)上層為淡紅色透明血漿，其次為薄薄的只密白色環(huán)，白色環(huán)衛單核細胞淋巴細胞。